組織培養前實驗室設計
在進行植物組(zǔ)織培養工作之前,首先應對工作中需要哪些最基本(běn)的設備條件有個(gè)全麵的了解,以便因地製宜地利用現有房屋,或新建、改建實驗室。實(shí)驗室的大小取決於工作的目的和規(guī)模。以工廠化生產為目的,實驗室規模太小,則會限製生產,影響效率。在設計組織培養實(shí)驗室時,應按組織培養程序(xù)來(lái)沒計,避免某些環節倒排,引起日後工作混亂。植物組織培養是在嚴格無菌的條件下進行的。要做到(dào)無菌的條件,需(xū)要一定的設備、器材和用(yòng)具,同時還需要(yào)人(rén)工控製溫度、光照、濕度等培養條件。
實驗室設計原則(zé):保證無菌操作,達到工作方(fāng)便,防(fáng)止汙染。
實驗室組成:化學實驗室、洗滌菌室(shì)、無菌操(cāo)作室(接種室)、培養室、細胞學實驗室、其他小型(xíng)儀器設(shè)備。
1) 化學(xué)實驗室(準備室):完成所使用的各種藥品的貯(zhù)備、稱量、溶解(jiě)、配製、培養基分裝等。
主要設(shè)備:藥品櫃、防塵櫥(放置(zhì)培養容器(qì))、冰箱、天(tiān)平、蒸餾水器、酸度計及常用的培養基配(pèi)製用玻璃儀器.
2) 洗滌、滅菌室:完(wán)成(chéng)各種器具的洗滌、幹燥、保存、培養基的滅菌等。
主要(yào)設備:水池、操作台、高壓(yā)滅菌鍋、幹燥滅菌器(如烘箱)等。
3) 無菌操作室(接種室):主要用於植(zhí)物材料的消毒、接種、培養物的轉移、試管苗的繼(jì)代、原生質體的製備(bèi)以及一切需要進行無菌操作(zuò)的技術程序。
主要設備:紫外光源、超淨工作台、消毒器、酒精燈、接種器械(接種鑷(niè)子、剪刀、解剖刀、接種針)等(děng)。
接種室宜小不宜大,一般7~8平米,要求(qiú)地麵、天花板及四壁(bì)盡可(kě)能密閉(bì)光滑,易(yì)於清潔和消毒。配置拉動門,以減少開關門時的空氣擾動。接種室要求幹爽安靜,清潔明亮。在適當位(wèi)置吊裝1~2盞紫外線滅(miè)菌燈,用以(yǐ)照射滅菌。最好安裝一小型空調,使室溫可控,這樣可(kě)使門窗緊閉,減(jiǎn)少與外界空(kōng)氣對流。接種(zhǒng)室應設(shè)有緩衝問,麵積1m2為宜。進入無(wú)菌操作(zuò)室前在此更衣換鞋,以減少進出時帶入接(jiē)種室雜菌。緩衝(chōng)間最好也安一盞紫外線滅菌燈,用以照射滅菌。
4) 培養室:培養室是將接種(zhǒng)的材料進行培養生長的場所。培養室的大小可(kě)根據需要培養架的大小、數目、及其(qí)他附屬設備而定。其設計以充分利用空(kōng)間和節省能源為原(yuán)則。高度比培養架略高為宜,周圍牆壁要求有絕(jué)熱防火的性(xìng)能。
培養材料放在培養架上培養。培養架大多(duō)由金(jīn)屬製成,一般設5層(céng),最(zuì)低一層離地高約lOcm,其他每層間隔30cm左右,培(péi)養架(jià)即(jí)高1.7m左右。培養架長(zhǎng)度都(dōu)是根據日光燈的長度而設計,如采用(yòng)40W日光燈,則長1.3m,30W的長lm,寬度一般為60cm。
培養室最(zuì)重要的因(yīn)子是溫度,一般保持在20—27℃左右,具備產熱裝置,並安裝窗(chuāng)式或立式空調機。由於(yú)熱帶植物和寒帶植(zhí)物等不同種類要(yào)求不同溫度,最好不同種類有不同的培養室。
室內濕度也要求恒定,相對濕度以保持在70%~80%為(wéi)好,可安裝加濕器。控製光照時間可安裝定時開關鍾,一般需要每天光照10-16h,也(yě)有的需要連續照明。短(duǎn)日照植物需要短日照條件,長日照植物需(xū)要長日照(zhào)條件。現代(dài)組培實(shí)驗室大多設(shè)計為采用天然太陽光照作為主要能源,這樣不但可以節省能源,而且組培苗接受太陽光生長良好,馴化易成活。在陰(yīn)雨天可用燈光作補充。
主要設備:培養架(控溫控光控濕)、搖床、培養箱、紫外光源等。
5) 細胞學實驗室:用於對培養物的觀察分析與培養物的計數等。主要設備:雙筒實體顯微鏡、顯微鏡、倒置顯微鏡等。
6) 其他小型(xíng)儀器設(shè)備:分注器、血(xuè)球計數器、移液槍、過(guò)濾滅菌器、電爐等加熱器具、磁力攪拌器、低速台式離心機(jī)等。