無菌室的建造規程（chéng）

　　1. 無菌（jun1）室應設有無（wú）菌操作間和緩衝間，無菌操作間潔淨度應達到10000級，室內溫度保持在20-24℃，濕度保持在45-60%。超淨台潔淨（jìng）度應達到100級。

　　2. 無菌室應保持清潔，嚴禁堆放雜物，以防汙染。

　　3. 嚴（yán）防（fáng）一（yī）切滅菌器材和培養基汙染，已汙染者應停止使用。

　　4. 無菌室應備有工作濃度的消毒（dú）液，如5%的甲酚溶液，70%的酒精，0.1%的新潔爾滅溶液（yè），等等。

　　5. 無菌室應（yīng）定期（qī）用（yòng）適（shì）宜的消毒液滅菌清潔（jié），以保證無菌室的潔（jié）淨度符合要求。

　　6. 需要（yào）帶入無菌室使用的儀器，器械，平皿等一切（qiē）物品，均應包紮嚴（yán）密，並應（yīng）經過適宜的方（fāng）法滅（miè）菌。

　　7. 工作人員進入無菌室前，必須（xū）用肥（féi）皂或消毒液洗手消毒，然後在緩衝間更換專用工作服，鞋，帽子，口罩（zhào）和手套(或用70%的乙醇再（zài）次（cì）擦拭雙手)，方可進入無菌室進行操作。

　　8. 無菌室使用前必須打開無菌室的紫外燈輻照滅菌30分鍾以上，並且同時（shí）打開超淨台進行吹風。操作（zuò）完畢，應及時清理無菌室，再用紫外燈輻照滅菌20分鍾。

　　9. 供試品在檢查前，應保持外包裝完整，不得開啟（qǐ），以防汙染。檢查前，用70%的酒精棉球消毒外表麵（miàn）。

　　10. 每次操作過程（chéng）中（zhōng），均應做陰性對（duì）照，以檢查無菌（jun1）操作的可靠性。

　　11. 吸取（qǔ）菌液時（shí），必須用吸（xī）耳球吸（xī）取，切勿直接（jiē）用口（kǒu）接觸吸管。

　　12. 接種針每（měi）次使用前後，必須通過火焰灼燒滅菌，待（dài）冷卻後，方可接種培養物。

　　13. 帶有菌液的吸管，試管，培養皿等（děng）器皿應浸（jìn）泡在盛有5%來蘇爾溶液的消毒桶內消毒，24小時後取出衝洗。

　　14. 如（rú）有（yǒu）菌液灑在桌上或地上，應立即用5%石碳酸溶液或3%的來蘇爾傾覆在被汙染處至（zhì）少30分鍾，再（zài）做處理。工作衣帽等受到菌液（yè）汙染時，應立即脫去，高壓（yā）蒸汽滅（miè）菌（jun1）後洗（xǐ）滌。

　　15. 凡帶（dài）有活菌的（de）物品，必須（xū）經消毒後，才能在水龍頭下衝洗，嚴禁汙染下（xià）水道。

　　16. 無菌室應每（měi）月檢查菌落數。在超淨工作台開（kāi）啟的狀態下，取內徑（jìng）90mm的無（wú）菌（jun1）培養皿若幹，無菌操作分別注入融化並（bìng）冷（lěng）卻至約45℃的營養瓊脂培養基約15ml，放至凝固後，倒置於30～35℃培養箱培養48小時（shí），證明無菌後，取平板3～5個，分別放置工作位置的左中右等處，開蓋暴露30分鍾（zhōng）後，倒置於30～35℃培養箱培（péi）養48小時，取出檢查。100級潔淨區平板雜菌數平均（jun1）不得超過1個菌落，10000級潔淨室平均不得超過（guò）3個菌落。如超過限度（dù），應對無菌室進行徹底消毒，直至重複（fù）檢查（chá）合乎要求為止。