無菌室的（de）建造規程

　　1. 無菌室應設有無菌操作間和緩衝間，無菌操作間潔淨度應達到10000級，室內溫度保（bǎo）持在20-24℃，濕（shī）度保持在45-60%。超淨台潔淨度應（yīng）達到100級。

　　2. 無菌（jun1）室應保持清潔，嚴禁堆（duī）放（fàng）雜物，以防汙染。

　　3. 嚴防一切滅菌器材和培養基汙染，已汙染者應停止使用（yòng）。

　　4. 無菌室應備有工作濃度的消毒液，如5%的甲酚溶液（yè），70%的（de）酒精（jīng），0.1%的新（xīn）潔爾滅溶液，等等。

　　5. 無菌（jun1）室應定期用適宜的消毒液滅菌清（qīng）潔，以保證無菌室（shì）的潔淨度（dù）符合（hé）要（yào）求。

　　6. 需要帶入（rù）無菌（jun1）室使（shǐ）用的儀器，器械，平皿等一（yī）切物品（pǐn），均應包紮嚴密，並（bìng）應經過適宜的方法滅菌（jun1）。

　　7. 工作人員進入無菌室前，必須用肥皂或消毒液洗（xǐ）手消毒，然後在緩衝間更換專用（yòng）工作服，鞋，帽子，口罩和（hé）手套(或用70%的乙醇再次擦拭雙手（shǒu）)，方可進入（rù）無菌室進行操作。

　　8. 無菌室使（shǐ）用前必須（xū）打開無菌（jun1）室的紫外燈輻照滅菌30分（fèn）鍾以上，並且同時打開超淨台進行吹風。操作完畢，應（yīng）及時清理無菌室，再用紫外燈輻照滅菌20分鍾。

　　9. 供試品在檢查前，應保持（chí）外包裝完整，不（bú）得開啟，以防汙染。檢查前，用70%的酒精棉球消毒外（wài）表麵。

　　10. 每次操作過程中，均應做陰性對照（zhào），以（yǐ）檢查無菌操作的可靠性。

　　11. 吸取菌液時，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管。

　　12. 接種針每次使用前後，必須（xū）通過（guò）火焰灼燒滅菌，待冷卻後，方可接種培養物。

　　13. 帶（dài）有菌液的吸管，試管，培養皿等器皿應浸泡在盛有5%來（lái）蘇爾溶液的消毒（dú）桶內消毒，24小時後取出衝（chōng）洗。

　　14. 如有菌液（yè）灑在桌上或地上，應立即用5%石碳酸溶液或3%的來蘇爾傾覆在被汙染處至少30分鍾，再做（zuò）處（chù）理。工作衣帽等受到菌液汙（wū）染時，應立即脫去，高壓蒸汽滅菌後洗滌。

　　15. 凡帶有活菌的物品，必須經消毒後，才能在水龍頭下衝洗，嚴禁汙染下水道（dào）。

　　16. 無菌室應每月檢查菌落數。在超淨工作台開（kāi）啟的狀態下，取內徑（jìng）90mm的無菌培養皿若幹，無菌操（cāo）作分（fèn）別注入融化並（bìng）冷卻至約45℃的營養瓊（qióng）脂培養基約15ml，放至凝固後，倒置於30～35℃培養箱培養48小時，證明無菌後，取平板3～5個（gè），分別放（fàng）置工作位置的（de）左中右等處，開蓋暴（bào）露30分鍾後，倒置於30～35℃培養箱培養48小（xiǎo）時，取出檢查（chá）。100級潔淨區平（píng）板雜菌數平均不得超過1個菌（jun1）落，10000級潔淨室平（píng）均不得（dé）超過3個菌落。如超（chāo）過限度，應對無菌室進行徹（chè）底消毒，直至重複檢查合（hé）乎要求為止。